非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是生物化学和分子生物学领域常用的一种技术，主要用于分离蛋白质和核酸。这种技术依赖于样品在电场作用下通过具有不同孔隙大小的聚合物凝胶的迁移速度的差异进行分离。本文旨在为初学者提供一份全面的指南，帮助您从基础知识到高级应用逐步掌握非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的技术。
非变性PAGE是一种在未改变样品本质状态下进行的电泳技术。与SDS-PAGE（含有十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶电泳）不同，非变性PAGE不使用任何使蛋白质变性的化学试剂。这使得非变性PAGE尤其适用于需要保持蛋白质原有形态和功能研究的情况。
进行非变性PAGE需要以下几种设备和材料：
电泳槽和电源：用于提供稳定的电流。
聚丙烯酰胺凝胶：凝胶的浓度会根据分离的蛋白质大小而变化。
样品和缓冲液：保证样品在电泳过程中的稳定性和pH值。
凝胶的制备是非变性PAGE的第一步。这一步骤需要精确计算出所需的聚丙烯酰胺的浓度，以及横向和纵向连接剂的比例。
加载样品前，需要使用适当的缓冲液调整样品的pH和离子强度，以优化电泳结果。
电泳过程中，应保持恒定的电压，以避免凝胶过热或样品迁移速度不一致。
电泳完成后，通过染色和影像分析软件对结果进行可视化和定量。
非变性PAGE广泛应用于蛋白质相互作用的研究、遗传变异的分析等领域。
调整凝胶的成分和孔隙大小可以针对特定的分析需求进行优化。
介绍如二维电泳和毛细管电泳等非变性PAGE的变体。
提供一些实用的技巧和建议，帮助初学者避免这类常见问题。
掌握非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅能够提高实验的准确性和效率，还能够在生物学研究中发挥重要作用。希望通过本文的指导，读者能够更好地理解和运用这一技术，推动相关科学的发展。
